厚朴饮片的分级评价标准及应用研究

负责人:翁德会

校级科研基金，2016年立项，编号2016001,2016.6——2019.5

一、研究本项目的和意义

    厚朴始载于《神龙本草经》，列为中品。厚朴也是“中华人民共和国药典”收载品种，其主要活性成分是厚朴酚、和厚朴酚，一般以生长15～20年的干皮、根皮和枝皮的含量最高。由于厚朴的应用日夜广泛，资源的严重溃乏，再加上厚朴为木本植物，生长周期长，一般需要15～20年以上方可采剥，皮剥即亡，长期以来，不仅药材供不应求，大量混淆品、伪品不断涌现，而且野生资源破坏严重。早在20世纪80年代，被“国家重点保护野生药材物种名录”列为2级保护物种，是中国二级珍稀保护植物，从种源上看,厚朴已属濒危品种。

厚朴饮片是临床常用中药，在制药业中，采用厚朴配方的中药方剂和中西成药多达700余种。大量研究证明，厚朴饮片作为常用中药，临床上应用越来越多。厚朴具有明显抗菌活性。能够有效的抑制细菌在口腔内分解蛋白质产生口臭，还可抑制口腔溃疡形成，且毒副作用小，因此，厚朴在牙膏业的生产中早已大量使用。同时在中药学中记载厚朴还具有除螨的功效，在化妆品的制备行业也具有发展前景。

    厚朴作为植物药物资源和食品资源已得到了国家认可，其饮片组方入药、或提取物作为中成药、食品、饮料的组方或添加剂的应用前景广泛，为提高人民的生活质量，为人民的健康作出多方面的贡献。

厚朴市场营销信息调查显示：由于厚朴市场需求巨大，长期以来供不应求，长期以来质优正品货市场畅销偏紧、质次者也充斥市场，伪品不断出现，产地较多、规格复杂、价格悬殊，同一产地外观性状不同或不同产地的厚朴饮片其活性差异显著^[15-16]。至此，为规范厚朴饮片市场，保证其优良品质，将该饮片进行规格分级显得尤为重要。

《现代中药材商品手册》在记载的“现行局部标准”中对厚朴药材的分级标准已有记载，将厚朴的药用部位分为干皮、根皮和枝皮。干皮习称“筒朴”；近根部的干皮习称“靴筒朴”，又叫“篼朴”；枝皮习称“枝朴”；根皮习称“根朴”。但是目前市场上所用的厚朴一般都为切制好的饮片，没有分级标准，市场上买到的厚朴饮片，其“规格”项下写的内容是“统”、“重量”（KG/袋）、“形状”（片、块、丝）等，较为混乱。企业生产的厚朴饮片规格也各不相同，有厚朴丝、厚朴段、厚朴方块等，十分混乱；市场上流通的厚朴饮片有净厚朴，姜厚朴，医院临床配方所用多为姜厚朴。各企业都有各自的炮制工艺和质量控制参数，得到的成品颜色质地各异，这直接导致饮片的内在质量的差异。

综上所述，根据市场需求，急需对厚朴饮片按照市场规律进行分级研究，为临床、生产商和消费者提供有力保障，达到对商家实行优质优价、对临床实行优质优效、对消费者实行优价优质的目的，但是目前对厚朴饮片的分级研究主要集中在外观性状和具有活性理化成分（厚朴酚、和厚朴酚）含量上的研究，虽然目前有人对厚朴饮片基源物质DNA有少许研究，但是利用基源物质DNA的特征进行饮片分级的研究甚少。

二、本项目的研究内容：

本课题对不同产地和同一产地不同级别（传统外观分级方法）的厚朴饮片进行分级研究，旨在将传统的饮片分级方法与现代技术分析相结合，以明确的指标来确定商品厚朴饮片分级与质量评价的关联性。通过传统的鉴别方法,如观察饮片的颜色、质地、味道等将厚朴进行分级，综合现代科学评价质量的分析手段，即性状显微鉴别、薄层色谱鉴别，水分、灰分、浸出物（含水溶性、醇溶性）、挥发油、有效成分（厚朴酚与和厚朴酚）等的含量，来确定与厚朴饮片分级相关的指标，同时以厚朴基源物质DNA的PCR扩增技术对不同产地的厚朴饮片进行研究，并对其进行综合分析，进一步揭示厚朴饮片的分级与质量评价的相互关联。

    1、以恩施紫油厚朴饮片为样品，先用经验传统方法对其进行分级，再用现代技术分析方法进行研究，以明确的指标来确定商品厚朴饮片分级与质量评价的关联性。

    2、选取不同产地（湖北恩施、陕西商洛、重庆南川等等）的厚朴饮片，将传统的厚朴分级方法与现代技术分析相结合进行分级研究，来确定商品厚朴饮片分级与质量评价的关联性，同时对厚朴基源物质DNA的进行PCR扩增，对不同产地的厚朴饮片进行研究，并对其进行综合分析，进一步揭示厚朴饮片的分级与质量评价的相互关联。

3、制定厚朴饮片的分级标准。

三、预计突破的难题：

1、以不同产地和同一产地不同厚度的厚朴饮片，以传统分级方法和现代技术分析方法分别进行研究，并进行分级。

2、传统分级方法与现代技术分析分级方法存在一定的差异，如何确定两种分级方法的一致性与质量评价的关联性。

3、筛选厚朴基源物质DNA的PCR扩增条件，并对不同产地的厚朴饮片进行基源研究，揭示厚朴饮片的分级与质量评价的相互关联。

4、确定厚朴饮片的分级标准。

四、本项目的创新之处

1、饮片分级中结合了传统分级方法和现代技术分级方法，特别是新增使用了PCR扩增技术，对厚朴基源物质DNA进行研究，突破对厚朴饮片分级的原有分析方法。运用该方法对不同产地的厚朴饮片进行分级，能更准确的反映不同产地的厚朴饮片的差异，有利于厚朴饮片的分级管理，为临床、生产商和消费者提供有力保障，达到对商家实行优质优价、对临床实行优质优效、对消费者实行优价优质的目的，同时可以指导厚朴的栽培技术，抢救濒危品种。

2、PCR扩增技术是从基源DNA上来研究，具有独一无二性，目前已在医药、生命科学、农业科学、环境科学、考古学及历史事件解读、卫生安全等领域广泛使用，使用该技术对厚朴饮片进行分级研究，对厚朴饮片分级准确性具有深远意义。

五、本项目预期的成果：

1、发表论文1~2篇

2、研究报告

3、厚朴饮片分级标准，为分级管理提供依据